<p><strong>Pendahuluan : </strong>Bakteri <em>Staphylococcus aureus</em> merupakan bakteri yang paling sering menyebabkan infeksi. Pemberian antibiotik merupakan upaya pengendalian terhadap infeksi yang dapat menyebabkan resisten. Bakteri <em>Staphylococcus aureus</em> telah resisten terhadap antibiotik ampisilin, amoksisilin-asam klavulanat, amoksisilin, penisilin G, sulbenisilin, kloramfenikol dan siprofloksasin sehingga penanganan terhadap infeksi <em>Staphylococcus aureus</em> relatif sulit. Daun Srikaya diketahui mengandung senyawa flavonoid, saponin dan tannin yang memiliki efek antimikroba. <strong>Metode Penelitian : </strong>Dalam penelitian ini ditentukan Kadar Hambat Minimum (KHM) dengan menggunakan metode dilusi padat.Penelitian ini merupakan penelitian eksperimen analitik dengan <em>post test only control group design</em>. Sampel dalam penelitian ini adalah bakteri <em>Staphylococcus aureus</em> yang merupakan stok kultur milik Balai Besar Laboratorium Kesehatan (BBLK) Surabaya. Variabel independen dalam penelitian ini adalah ekstrak daun srikaya (<em>Annona squamosa L.</em>) dengan konsentrasi 3%, 6%, 12% dan 24%. Variabel dependen dalam penelitian ini adalah bakteri <em>Staphylococcus aureus</em>. Data dianalisis dengan uji one way ANOVA dilanjutkan uji <em>Post Hoc</em> LSD dengan nilai probabilitas (p)&lt;0,05. <strong>Hasil Penelitian : </strong>Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat penurunan jumlah koloni bakteri <em>Staphylococcus aureus</em> yang berbanding terbalik dengan peningkatan konsentrasi ekstrak daun srikaya mulai dari konsentrasi 3% hingga 24%.<strong>Kesimpulan : </strong>Kesimpulan pada penelitian ini yaitu ekstrak daun srikaya mempunyai efek antimikroba terhadap pertumbuhan <em>Staphylococcus aureus</em> dengan KHM terletak pada konsentrasi dua kali lipat dari konsentrasi 24%. <strong>Saran : </strong>Sebagai referensi bakteri yang dapat menyebabkan infeksi dan dapat menangsninys dengan antimikroba alami yang minimefek samping disbanding dengan BKO</p><p><strong>Kata Kunci</strong>: Antimikroba, Ekstrak Daun Srikaya, , Kadar Hambat Minimum (KHM), <em>Staphylococcus aureus</em></p>